Тапиока, будучи высушенной и измельченной, жадно всасывает антиген и, хотя только иногда вызываемое ею воспаление ведет к нагноению, неизменно повышает количество антител в сыворотке. Вместе с этим оказалось, что токсин с тапиокой является значительно менее ядовитым и хорошо переносится, даже в смертельных дозах. Что это обезвреживание токсина не зависит от непосредственного влияния на него тапиоки, доказывается опытом растворения в этой смеси тапиоки птиалином, причем сила токсина восстанавливается. Но не только тапиока, но и иные разнообразные примеси к токсинам и анатоксинам дали благоприятные результаты. Наиболее пригодным, по мнению Рамона, в смысле повышения эффективности иммунизации оказалось включение антигена в смесь ланолина с маслом, что повышало выход антител во многие сотни раз.
Эти результаты Рамона были повсеместно подтверждены. Тогда стали применяться самые разнообразные вещества для смешения с токсоидами или токсинами. «Некоторые токсины, говорит Рамон, дифтерийный, столбнячный, абрин, смешанные с различными веществами – тапиокой, жирами, хлористым кальцием, квасцами и т. п. – обнаруживают пониженную токсичность в теле животного». Но, теряя токсичность, они полностью сохраняют антигенные свойства и даже их иммунизирующая способность возрастает. Так, например, иммунитет, получающийся в результате двух впрыскиваний антигена в ланолине, во много тысяч раз больше, чем тот, что возникает от тех же двух доз одного анатоксина.
Но не только по отношению к токсинам и анатоксинам имеют значение эти различные «стимулирующие и вспомогательные» вещества. Иммунизация живыми микробами – дифтерийной бактерией, стафилококками, бациллой антракса – значительно выигрывает от этих примесей.
Так, уже теперь с успехом применяется вакцинация животных от сибирской язвы, при помощи культур ослабленных сибиреязвенных бактерий в смеси с сапонином. Очень удачно проводятся предохранительные прививки от эмфиматозного карбункула и от рожи свиней посредством культур соответственных бактерий в полужидком агаре.
Замечательные результаты были получены в опытах на морских свинках от ланолиновых и парафиновых туберкулезных вакцин. Так, свинки, вакцинированные туберкулезными бактериями, кипячеными в парафине, пережили контрольных на 3 года.
Особенное внимание заслуживает удачная вакцинация баранов при помощи первой сибиреязвенной вакцины, заключенной в ланолин. Этот результат доказывает, что добавочные вещества не ослабляют, но, напротив, усиливают действие антигенов. А на туберкулезной вакцинации можно видеть, что, несмотря на замедленное всасывание, эффект от введения антигена в парафине не только усиливается, но и ускоряется, о чем можно судить по быстроте появления аллергии.
От чего зависит такое действие примесей? Как объясняются благоприятные результаты от прибавления «вспомогательных» и стимулирующих веществ?
Все они, связывая или обволакивая антиген, задерживают его на месте введения, образуют на более или менее продолжительное время склад его, депо, которое медленно рассасывается, отдавая антиген в соки организма. Но такой же склад прививочного материала возникает и при внутрикожной прививке, так как вследствие большой плотности кожи введенная в нее масса прививаемой жидкости сдавливает тканевые щели и препятствует оттоку в кровь.
Насколько замедляется всасывание антигена вследствие примесей видно из опытов, которые показывают, что анатоксин может быть найден через 38 дней после введения с ланолином, тогда как без примеси он исчезает через 2 дня. Пример убитых туберкулезных бактерий в вазелиновом масле.
Кроме замедления всасывания, примеси ведут обыкновенно также к реакции – воспалению вплоть до нагноения – на месте введения. Воспаление это Рамон считал очень важным фактором, повышающим эффективность иммунизации. Для доказательства этого он применял так называемую концентрированную вакцинацию. Он впрыскивал по нескольку раз в день в течение нескольких дней ничтожные дозы токсина одним кроликам в разные части тела, а другим – в одно и то же место, что вызвало в последнем случае явление воспаленного участка. Первые кролики погибли от отравления, вторые – приобрели иммунитет.
Воспаление, как известно, задерживает всасывание, но быть может, кроме того, возникающими в течение его продуктами видоизменяет токсин.
Опыт показывает, что в воспаленном участке нельзя найти только что туда внесенного токсина. Известно также, что воспаленный очаг способен уничтожать впрыснутых в него микробов, как, например, стрептококков, пастерелл, бактерий синего гноя. Возникающий при воспалении экссудат – лейкотаксин – видоизменяет антиген и, действуя на ретикуло-эндотелий, способствует выработке антител при помощи видоизмененного антигена. Таким образом, воспалительное раздражение, приводящее к экссудации плазмы и к иммиграции лейкоцитов, дает вследствие совокупного действия обоих этих факторов вещества, парализующие и уничтожающие раздражителей и способствующие также нарастанию антител при посредстве видоизмененных антигенов.