В 1824 году при монастыре устроена была больница на 12 монахинь, для которой выстроили особые кельи. В монастыре веками культивировались «светличные работы» — шитье, вышивание жемчугом, нанизывание бус, изготовление риз, пелен, покровов и другой церковной утвари, а также царских шуб и сорочек. А. Ф. Малиновский, историк и архивист первой трети XIX века, пишет в «Обозрении Москвы», воссоздавая образ кремлевского института благородных девиц средневековой Руси: «В Вознесенской обители было училище для юных дев юношеского состояния (подобное училищу для юношей в соседнем Чудовом монастыре. —
В субботу накануне Вербного воскресенья половину Красной площади заполнял импровизированный вербный базар; на нем торговали искусственными веточками вербы, которые изготовляли монахини Вознесенского монастыря. Гуляние с веточками вербы происходило не только на Красной площади, но и в самом монастыре: народ прохаживался по двору и террасам, рассматривал выставку искусственных цветов, собранных в букеты и гирлянды, и покупал их у монахинь. 11 августа из монастыря направлялся крестный ход в кремлевский Успенский собор.
Здания монастыря выглядывают из-за кремлевской стены на многих старинных изображениях Красной площади. Они запечатлены на акварелях Ф. Алексеева (1800-е гг.), этюдах М. Н. Воробьева (1817–1818), картинах и литографиях О. Кадоля (1830-е гг.), Э. Гертнера (1838), Ж. А. Барона (1845–1846), Ж-Б. Арну (1846), Ф. Бенуа (1850-е гг.), Н. Е. Маковского (1867). Парадный готический фасад по Спасской улице; трогательные картинки невозвратного прошлого: мощенный камнем монастырский двор, заросший кустами и деревьями, фигурки беседующих монахинь, купол Екатерининской церкви, верх монастырской колокольни на фоне Спасской башни… Издали монастырский комплекс с золотыми главами храмов изобразил М. В. Нестеров на картине «Кремль зимой» (1897).
В конце XIX — начале XX века необщежительный монастырь относился к I классу. Описание Кремля 1883 года говорит о нем так: «Монастырь Вознесенский считается по спискам первым из женских монастырей в России. В нем числится около 40 инокинь; он славился еще с древности рукоделием монахинь и строго держится установлений: он запирается на всю первую неделю Великого поста». В 1907 году в монастыре жили игуменья, 62 монахини и 45 послушниц; он владел 195 десятинами земли. Монастырь обладал в 1910-е годы крупным капиталом — свыше 200 тысяч рублей. Известен был в Москве замечательный хор вознесенских монахинь. При монастыре действовало общество хоругвеносцев. Протоиерей Вознесенского монастыря А. И. Пшеничников был основателем одного из последних (1914) подмосковных монастырей, возникших до революции, — Сергиево-Дубровского близ города Вереи. Последней игуменье Вознесенского монастыря, Евгении, в 1917 году исполнилось восемьдесят лет. Наверное, она не ждала уже от жизни никаких потрясений…
План Вознесенского собора Вознесенского монастыря с обозначением гробниц цариц и великих княгинь. Конец XIX века.
С 1407-го по 1731 год обитель служила местом захоронения русских великих княгинь, цариц и царевен (до основания Вознесенского монастыря их хоронили в кремлевских соборе Спаса на Бору и церкви Лазаря, в позднейшие времена — в Петербурге). В Вознесенском соборе стояли вдоль стен и столпов 38 гробниц (всего 51 захоронение) — от основательницы монастыря Евдокии до царевны Наталии, сестры Петра II, Софья, Мария, Евдокия, Наталья, Ирина… Жены Ивана III, Ивана Грозного (четыре покоились рядом), Михаила Федоровича, Василия Шуйского, мать Петра I Наталья Нарышкина… Софья Палеолог, Анастасия Романова, Евфросиния Старицкая, Елена Глинская, Марфа Собакина, Софья Витовтовна, Марфа Нагая, Ирина Годунова, Мария Милославская, Агафья Грушецкая — все они упокоились здесь. Историк С. М. Соловьев писал, что русские государи после пасхального богослужения шли сначала в Вознесенский собор — поклониться гробу матери, и лишь затем в Архангельский, к гробу отца. Служили здесь и заграничные православные патриархи, получая богатые подарки от царей. В 1667 году три патриарха — Антиохийский, Александрийский и Московский — совершили здесь торжественную панихиду над гробами цариц.