Замечательнейшей особенностью многих фильтрующихся вирусов является их способность вызывать развитие крупных внутриклеточных включений в поражаемых тканях. Эти включения могут находиться в плазме, в ядре или в них обоих. Соответственно этому они и классифицируются.
Относительно природы этих включений имеется три мнения. Первые- ученые, открывшие их, считали их паразитами. Так, Негри назвал включения при бешенстве Neurorhyctes hydrophobiae, а Гуарниери вакцинные включения – Cytorhyctes vaccinae и vaviolae.
Затем Провачек[35] высказал иной взгляд на эти образования. Они, по его мнению, являются не паразитами, но результатом реакции пораженных клеточек на возбудителей. Реакция эта заключается в выделении клеточками веществ, обволакивающих и окутывающих паразитов. Последние оказываются прикрытыми этим продуктом реакции как бы плащом или хламидой. Поэтому Провачек назвал возбудителей включений хламидозоями, а голых возбудителей, проходящих через фильтры, – элементарными тельцами.
Наконец, представители третьего взгляда думают, что включения не являются ни особыми паразитами, ни сочетанием ультрамикробов; с клеточными веществами, а просто продуктами реакции клеточки в ответ на раздражение, вызванное вирусами. При этом они опираются на следующие соображения. Во-первых, замечательно отсутствие разнородности со стороны включений. При старательном цитологическом анализе многие включения представляются аморфными и совершенно лишенными видимой внутренней организации, другие же состоят из различных частей, не похожих на какие бы то ни было организмы. Во-вторых, не все считают живыми вирусами элементарные тельца, находимые в вирулентных жидкостях. Известно, насколько белки и другие мелкораздробленные вещества симулируют своим видом микробов. До сих пор, однако, имеются приверженцы всех трех перечисленных теорий. Так, недавно еще указывалось, что тельца Негри являются панспоробластами микроспоридий.
Подробное описание включений[36] приводит к следующим общим выводам.
1. Точная химическая природа включений неизвестна. Тельца Гуарниери растворимы в слабой уксусной кислоте, что указывает на белковый состав. Но они не дают миллоновой реакции. Вообще, однако, химические исследования включений крайне недостаточны. Единственное исключение представляют фильтрующиеся вирусы насекомых, при которых включения могут быть выделены в чистом виде и подвергнуты химическому исследованию. Это именно так называемые полиэдровые инфекции[37]. Они поражают только гусеничные и личиночные стадии некоторых видов перепончатокрылых. Более тщательно эти инфекции изучены на шелковичном черве, монашенке и цыганке. У шелковичных червей полиэдровая болезнь носит название желтухи или ожирения. Шелковичные черви покрываются перед смертью лимонно-желтыми пятнами, делаются вялыми, перестают есть; кожа принимает желтый блестящий вид. Заболевшие монашенки стремятся к вершине деревьев, где погибают в громадных количествах, оставаясь прикрепленными к коре. Кровь больных гусениц приобретает белый или коричневый цвет вместо нормального желтого. Через несколько часов после смерти все ткани дезорганизуются и разжижаются. При микроскопическом исследовании жидкости из тела мертвых гусениц обнаруживаются элементы распавшихся тканей и мириады полиэдров. Полиэдры шелковичных червей имеют в среднем от 3 до 5 μ в диаметре, но доходят и до 15 μ, начиная с 0,5 μ. Их формы варьируют. У шелковичных червей они имеют по 5, 6, 7, 8 и более фасеток. Иногда они состоят из концентрических слоев, напоминая крахмальные зерна. Центральное их ядро отличается более твердой консистенцией. Полиэдры легко раскалываются на обломки. Они трудно окрашиваются, растворимы в крепких кислотах и слабых щелочах, а также в трипсине и пепсине. Они дают все красящие реакции белков.
Возникновение полиэдров хорошо изучено и представляет большой интерес. Они появляются внутри ядер клеточек кровяных, жировой и других тканей. Первое проявление заболевания клетки выражается в слиянии зернышек хроматина и нуклеолей. Вследствие этого образуются крупные хроматофильные массы, усеянные мелкими зернышками хроматина. Внутри светлого пространства, освобожденного слиянием ядерного материала, окраска по Гимзе обнаруживает присутствие мельчайших зернышек. Затем там же появляются очень мелкие полиэдры, которые постепенно вырастают, вполне заполняя ядро и распирая его оболочку до громадных размеров, причем хроматиновые массы исчезают.
Кровь больных червей заразительна даже при миллионном разведении. Беркефельдовские фильтраты также передают инфекцию. Следовательно, полиэдровая болезнь вызывается фильтрующимся вирусом. Но полиэдры, будучи тяжелее воды, легко могут быть изолированы центрифугированием и отмыты от всех других составных частей соков животного. Опыт показывает, что промытые таким образом полиэдры и их обломки не заключают в себе вируса. Быть может, однако, вирус в них уже уничтожен или только связан продуктами ядерной реакции и мог бы быть в последнем случае обнаружен катафорезом.