Эпидемии. Так начиналась микробиология

Электрический заряд вируса ящура и его изоэлектрическая точка стоит высоко – при pH 8,0. Этим он отличается от обыкновенных бактерий, которые несут электроотрицательный заряд и имеют более низкую изоэлектрическую точку. Однако спирохеты (кроме сифилитической) и многие трипанозомы несут электроположительный заряд, а из белков фибрин и глиадин обладают высокой изоэлектрической точкой.

Явления адсорбции могут, таким образом, изменять фильтруемость вирусов, которая, следовательно, зависит не только от их величины. С другой стороны, прохождение через определенной величины поры фильтров не дает точного определения величины вирусов, так как последние не получены в совершенно чистом виде. Поэтому нельзя утверждать, что фильтруется чистый вирус, а не связанный с агрегатами протеина или распадом клеток. Определения величины вирусов очень приблизительны. По д’Эрелю и Одюруа (1. с., стр. 215), фаг, ящур, герпес, бешенство, энцефалит, вакцина имеют вирусы величиной от 20 до 30 μμ (микромикронов, т. е. тысячной части микрона или миллионной миллиметра); мозаичный вирус несколько больше – от 30 до 36 μμ, а самый маленький из всех – вирус птичьей чумы – всего 5 μμ. Интересно сравнить величины видимых и невидимых микробов, представленные в следующей таблице (см. Одюруа, стр. 216).

Однако указанные размеры вирусов определяются другими исследователями иными. Так, Бехгольд и Вилла (см. Райверс, стр. 11) дают размеры фага более 35μμ и менее 200 μμ. Дюггар и Каррер (там же) полагают, что вирус табачной мозаики имеет такую же величину, как коллоидальная частица свежего однопроцентного раствора гемоглобина – 300 μμ. Цинссер и Танс (та же) считают, что вирусы саркомы Роуса, герпеса и фаг более 20 μμ, и менее 100 μμ. Но существуют разногласия даже относительно величины молекул кристаллического яичного белка и кристаллического гемоглобина. Так, Бехгольд указывает, что агрегат 50 молекул яичного белка более 4 μμ и менее 10 μμ в диаметре. А по дю Нуи (там же) одна молекула яичного белка имеет 4,1 μμ в диаметре. Если так трудно определить величину сравнительно чистых кристаллических веществ, то как можно надеяться установить величину вирусов, которые не получены в чистом виде? Райверс (стр. 12) приходит к выводу, что; многие вирусы, вероятно, настолько велики, что могут существовать в живом состоянии, и что другие, вероятно, настолько малы, что подтверждают мнение тех, которые утверждают, что они неживые. Пробовали выделять вирусы центрифугированием. Так, Мак Каллум и Оппенгеймер применили для определения возбудителя вакцины дифференциальное центрифугирование. Приготовив из смеси глицерина с водой среды различной плотности – от 1,11 до 1,16, они центрифугировали в них детрит и убедились путем опытов на животных, что возбудитель вакцины имеет удельный вес, равный 1,12 – 1,13. Очистив таким образом вирус, они нашли, что он состоит из мельчайших круглых телец, располагающихся: часто рядами и окрашивающихся карболовым фуксином и по Гимзе.

Обыкновенным центрифугированием удается осадить фага и рабический вирус. Вирусы ящура, герпеса и энцефалита не осаждаются. Но к ним еще не были применены ни дифференциальное центрифугирование, ни очень мощные технические центрифуги (40–50 тысяч оборотов в минуту).

Фильтрующиеся вирусы настолько малы, что невидимы при обычном микроскопическом исследовании. Это объясняется тем, что наиболее короткие световые волны, различаемые глазом, имеют длину волны около 300 μμ. Пробовали фотографировать вирусы при помощи ультрафиолетовых лучей (длина волны 30 μμ), но пока не получили удовлетворительных результатов. Бехгольд[32] изобрел способ увеличения объема вирусов. Он обрабатывает их хлористым золотом, которое ими адсорбируется. После удаления избытка хлористого золота приготовляется препарат на стекле и фламбируется для восстановления металлического золота. Затем производится вторичная протрава посредством формальдегида и промывание железистосинеродистым калием, который оставляет только соединенное с вирусом золото. Затем препарат рассматривается в. ультрамикроскопе. Этим способом Бехгольд определил, как выше указано, величину фага – >35 μμ и < 100 μμ.

При усиленной окраске, особенно при помощи протравы Леффлера, удается сделать видимыми некоторые из вирусов. Так, Пашен[33] нашел при оспенной вакцине мельчайшие шарики, так называемые элементарные тельца. Они имеют круглую форму, иногда состоят из двух шариков, соединенных перетяжкой в виде гантелей. Боррель[34]подтвердил присутствие пашеновских телец при вакцине, описав их в виде правильных кружков, расположенных иногда диплококками и короткими цепочками. Тем же способом при помощи протравы Боррель окрасил фагов и вирус контагиозного моллюска. Фаг представляется в виде совершенно однородных грануляций, отличающихся своей однообразной величиной от бактериального распада.

Мы уже видели, что тот же принцип окраски позволяет проследить развитие микроба перипневмонии.