Так, Райверс и Каррель размножают вирус вакцины в кашице из куриных зародышей, сея в них вакцину из семенных желез кроликов. Эта кашица, засеянная 25 – 250 единицами вируса в 1 см3, заключает через восемь дней от 10 до 100 тысяч единиц в 1 см3. Райверс, Гааген и Мюккенфус[42] недавно получили в тканевых культурах развитие включений, специфических для вакцины и герпеса. Культуры делались из кроличьей плазмы с прибавлением экстракта селезенки кролика и кусочков роговицы, зараженных вирусами вакцины или герпеса. В качестве посуды применялись широкие пробирки, в которые кусочки зараженной роговицы помещались между двумя слоями плазмы. Исследование через сутки или 48 часов показывало при вакцине образование типичных телец Гуарниери в размножающихся эпителиальных клеточках, после чего эти клетки подвергаются распаду. При заражении герпесом в эпителиальных клетках появляются ядерные включения, характерные для этого вируса.
Независимо от этих ученых Андрюс[43] наблюдал появление характерных ядерных включений в культурах ткани семенных желез, зараженных вирусом III.
Очень интересные результаты получены при действии фильтрованного экстракта саркомы Роуса на чистые культуры макрофагов и фибробластов. При заражении последних вирусом Роуса они не подвергаются никаким изменениям, и вирус быстро исчезает. Напротив, зараженные таким же способом культуры макрофагов начинают переваривать свою основу и вызывают появление большого количества вируса в жидкой среде. Вирус, однако, может также размножаться в макрофагах, не обнаруживающих морфологических изменений. Таким образом, хотя опухоль Роуса есть веретеноклеточковая саркома, злокачественностью обладают не фибробласты, а макрофаги. В настоящее время культуры эмбриональной кашицы и лейкоцитов служат Каррелю для массового приготовления вируса Роуса, причем ежедневно получается 1 см3 чрезвычайно вирулентной жидкости.
Тканевые культуры являются ценным методом изучения свойств и природы вирусов. Так, действуя на кусочки эксплантированной селезенки мышьяком, Фишер получил злокачественную саркому, которая в свою очередь продуцировала вирус Роуса. Вследствие этого возникло предположение, что этот вирус не живой микроб, а особое злокачественное вещество, порождаемое клеточками.
Неспособность вирусов расти в искусственных культурах доказывает, что они – облигатные паразиты, нуждающиеся в живых клеточках. Зависит ли это от потребности вирусов в каком-либо особом питательном веществе или от неполноты их метаболизма, неизвестно.
Вирусы, по-видимому, нуждаются не только в живых, но именно в размножающихся клеточках. Так, бактериофаг может растворять микробы и размножаться только при условии размножения соответственных бактерий.
То же наблюдается при мозаике растений. У взрослых растений поражения отмечаются только на молодых частях, на концевых ростках, на боковых почках. Если отрезать эти больные части, то растение кажется некоторое время свободным от болезни, которая снова обнаруживается, когда развиваются новые ростки.
У насекомых также поражаются вирусами только быстро растущие гусеницы и энергично перестраивающиеся личинки. Взрослые насекомые, как и заканчивающие рост растения, не болеют от вирусов.
Вакцина локализуется на поврежденной коже, как это известно со времени опытов Кальметта и Герена. Левадити обратил внимание, что размножение вируса в коже совпадает с усиленным митозом кожного эпителия. Этим сродством вируса к растущим тканям объясняется элективная локализация вакцины в яичках и яичниках и в эпителиальных опухолях.
Повреждения тканей играют важную роль при заражении вирусами потому именно, что они вызывают усиленное размножение клеточек для возмещения дефектов. Метастазы саркомы Роуса в яичниках отмечаются во время кладки яиц, так как при этом появляются молодые клеточки, участвующие в восстановлении расхода.
На основании этих фактов, а именно преимущественного поражения вирусами размножающихся клеток, неспособности их расти в искусственной питательной среде, а только в живых клеточках и, наконец, их исключительного свойства вызывать внутриклеточные включения, возникает предположение об их особенной локализации – внутри клеточных ядер. Эта гипотеза объясняла бы преимущественное поражение селящихся клеточек, когда ядра теряют свою оболочку, чем облегчается заражение ядерного вещества. В присутствии микробов изменяется обмен веществ в ядре, что объясняло бы появление включений из веществ, откладываемых в самом ядре или выбрасываемых в протоплазму. Для проверки этой гипотезы следовало бы изучить инфекции ядер видимыми паразитами (см. также Основы иммунологии, стр. 290).
Замечательной особенностью фильтрующихся вирусов является их изменчивость, ведущая к возникновению стойких и часто необратимых разновидностей, что подало повод к сравнению их с мутациями.
Следует различать двоякого рода изменчивость вирусов: во-первых, приспособление к жизни в новом организме и, во-вторых, приспособление к иной ткани в том же организме.
Эти оба вида «мутаций» хорошо известны у вируса оспы.